下调miR-34a对PC12细胞阿尔茨海默病体外模型细胞凋亡和氧化损伤的影响

目的探讨下调miR-34a对PC12细胞阿尔茨海默病体外模型细胞凋亡和氧化损伤的影响及机制。方法以Aβ_(25~35)处理PC12细胞构建阿尔茨海默病体外细胞模型,在细胞中转染miR-34a inhibitor,实时荧光定量(qRT)-聚合酶链反应(PCR)检测细胞中miR-34a表达水平,噻唑蓝(MTT)检测细胞增殖变化,流式细胞术检测细胞凋亡变化,Western印迹检测细胞中活化的含半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶(C-caspase-3)、p-蛋白激酶B(AKT)蛋白表达,试剂盒检测细胞中活性氧(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平。用AKT信号抑制剂处理转染miR-34a inhibitor后的PC12细胞,给予Aβ_(25~35)处理,利用上述方法测定细胞增殖、凋亡和ROS、SOD、GSH-Px水平。结果Aβ_(25~35)处理后的PC12细胞中的miR-34a表达水平明显升高,细胞增殖能力明显下降,细胞凋亡明显增多(均P<0.05),细胞中C-caspase-3蛋白表达水平、ROS水平明显升高,SOD和GSH-Px水平明显下降,p-AKT蛋白表达水平明显下降(均P<0.05)。转染miR-34a inhibitor后的PC12细胞经过Aβ_(25~35)处理,细胞中miR-34a表达水平明显下降,细胞增殖能力明显升高,细胞凋亡明显减少,细胞中C-caspase-3蛋白表达水平、ROS水平明显降低,SOD和GSH-Px水平明显升高,p-AKT蛋白表达水平明显升高(均P<0.05)。结论下调miR-34a减少PC12细胞阿尔茨海默病体外模型细胞凋亡,减轻氧化应激,作用机制与激活AKT信号有关。