熟地黄对6-羟基多巴胺诱导的多巴胺能神经细胞氧化应激的影响

目的分析熟地黄对6-羟基多巴胺(6-OHDA)诱导的多巴胺能神经细胞氧化应激的影响及机制。方法多巴胺能神经细胞SH-SY5Y分成对照组、6-OHDA组(6-OHDA处理)、熟地黄低剂量组(6-OHDA+120μmol/L熟地黄)、熟地黄中剂量组(6-OHDA+240μmol/L熟地黄)、熟地黄高剂量组(6-OHDA+480μmol/L熟地黄)、熟地黄高剂量+Anisomycin组(6-OHDA、p38MAPK信号激活剂Anisomycin和480μmol/L的熟地黄处理),Western印迹检测p-p38MAPK、Ki-67、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、剪切的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(酶切Caspase)-3蛋白表达,CCK-8实验检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,Cell ROX Green荧光探针法检测活性氧(ROS)水平,可见分光光度法检测丙二醛(MDA)含量,黄嘌呤氧化法检测超氧化物歧化酶(SOD)含量,比色法检测培养液上清中乳酸脱氢酶(LDH)含量。结果与对照组比较,6-OHDA组多巴胺能神经细胞中p-p38MAPK/p38MAPK表达量升高,细胞增殖活性降低,凋亡率升高,Ki-67蛋白表达量降低,Bax、酶切Caspase-3蛋白表达量升高,SOD含量降低,ROS、MDA含量升高,培养液上清中LDH含量升高,差异均有统计学意义(P<0.05);与6-OHDA组比较,熟地黄低、中、高剂量组多巴胺能神经细胞中p-p38MAPK/p38MAPK表达量逐渐降低,细胞增殖活性逐渐升高,凋亡率逐渐降低,Ki-67蛋白表达量逐渐升高,Bax、酶切Caspase-3蛋白表达量逐渐降低,SOD含量逐渐升高,ROS、MDA含量逐渐降低,培养液上清中LDH含量逐渐降低,差异均有统计学意义(P<0.05);与熟地黄高剂量组比较,熟地黄高剂量+Anisomycin组多巴胺能神经细胞中p-p38MAPK/p38MAPK表达量升高,细胞增殖活性降低,凋亡率升高,Ki-67蛋白表达量降低,Bax、酶切Caspase-3蛋白表达量升高,SOD含量降低,ROS、MDA含量升高,培养液上清中LDH含量升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论熟地黄通过抑制p38MAPK信号减轻6-OHDA诱导的多巴胺能神经细胞氧化应激,减少细胞凋亡。