环介导等温扩增法与重组酶聚合酶扩增法用于孕妇B族链球菌定植筛查的价值

目的探讨环介导等温扩增法(LAMP)与重组酶聚合酶扩增法(RPA)应用于孕妇B族链球菌(GBS)定植的筛查价值。方法选取2018年5月至2019年7月在徐州医科大学附属沭阳医院采集的68例孕35~37周孕妇阴道及直肠拭子作为主要检测标本,培养GBS菌株后提取菌株基因组DNA,应用LAMP及RPA反应引物进行基因扩增,确定LAMP及RPA的灵敏度、特异性差异及时效性指标。结果LAMP的基因扩增时间为45 min,产生结果需69 min,LAMP测定需要恒温仪温度为63℃;RPA的基因扩增时间为15 min,经凝胶成像产生结果共需要130 min,经免疫金试纸条检测产生结果仅需20~30 min,仪器需要使用恒温仪38℃、电泳仪和凝胶成像仪或免疫金试纸条。对标本检测发现,LAMP共检出6例阳性、62例阴性,与16s rRNA测序结果完全一致;而RPA电泳法共检出7例阳性(假阳性1例),61例阴性;RPA免疫金试纸条检测与LAMP测定结果一致。结论LAMP及RPA对设备依赖程度较低,RPA基因扩增速度快,LAMP总耗时相对较短,且具有可视性,RPA扩增后采用免疫金试纸条诊断的灵敏度及特异性与LAMP一致,两组均具有简单、高效的特点,适用于中小型医院孕妇GBS定植筛查。