4种方法检测鼠疫实验鼠的比较

目的探讨分离培养、实时荧光定量PCR法(real-time PCR)、酶联免疫吸附试验(ELISA)、反相间接血凝试验(RIHA)4种方法在鼠疫检测中的应用价值。方法用鼠笼捕捉黄胸鼠、黄毛鼠、褐家鼠等雷州半岛常见鼠种,选取250只健康鼠,根据鼠种、体重腹腔注射鼠疫菌EV76株活菌25~40亿不等,14 d内死亡鼠即时解剖,存活鼠于第14 d放血解剖,观察病变,每只鼠均同时进行分离培养鼠疫菌,real-time PCR探针法检测鼠疫菌caf1、chr392基因,ELISA和RIHA法检测鼠疫F1抗原。另选104只健康鼠仅进行上述4种方法检测。比较4种方法的灵敏度、特异度。结果在注射鼠疫菌的107只死亡鼠中检出106只阳性鼠,143只存活鼠中检出1只阳性鼠,没有注射鼠疫菌的104只鼠经检验确定为阴性鼠。分离培养、real-time PCR、ELISA和RIHA法的灵敏度分别是99.07%(106/107)、100%(107/107)、95.33%(102/107)、78.50%(84/107),特异度均是100%(104/104)。分离培养、real-time PCR、ELISA 3种方法之间灵敏度比较,差异在统计学上没有意义(P=0.051,Fisher精确检验),分别与RIHA比较,差异均有统计学意义(χ^(2)=22.714,P<0.001;χ^(2)=25.770,P<0.001;χ^(2)=13.313,P<0.001)。250只注射菌液鼠4种方法检测结果分布完全重合的有84.40%(211/250),不完全重合的有15.60%(39/250)。结论4种方法特异性强,灵敏度较高,其中RIHA灵敏度较其它3种方法稍差。在实际工作中,仍需多种方法同时检测,相互印证,综合判断,以防漏诊,利于及早发现疫情。