摘要
A cloned cDNA designated as MS3 sequence can detect an RNA species with a size of about 6 kb in undifferentiated embryonaI carcinoma (EC) cell lines but not in several differentiated cell lines derived from EC cells.This paper deals with the cytoplasmic distribution of this RNA species,MS3 RNA.NO MS3 RNA is observed in the cytoplasm of TDMI(trophoblastoma) cells.In the cytoplasm of PCC3 and F9(EC) cells,however。MS3 RNA is found in both polvsomal fraction and postpolysolnal fraction.About 20~55% MS3 RNA are included in polysome structure.This result implies that MS3 RNA is an actively translated message sequence and the protein specified by MS3 RNA will be a good marker for multipotent early embryonal cells.
MS3顺序是一个克隆化的cDNA顺序。它在未分化的小鼠胚胎癌细胞中能探查出一个分子量约为6kb的RNA,可是在已分化的由胚胎癌细胞衍生的其他细胞株中,它不能查到这RNA。由于小鼠胚胎癌细胞与小鼠胚胎的内细胞团及早期原始外胚层细胞十分相似,能否在这些胚胎细胞中查到MS3顺序的表达产物将是件使人感兴趣的事。研究这一问题的一条途径是寻找MS3 RNA所编码的蛋白质。为此需首先确定MS3 RNA是一种真正能被翻译的mRNA。因此本文研究MS3 RNA在细胞质中的分布情况。首先用离心法除去细胞质中的线粒体等大颗粒,然后通过7—47%蔗糖密度梯度离心,把其余部份分成多核糖体组份及次多核糖体组份,并从这些组份中提取出各自的总RNA。为了探查这些RNA中MS3 RNA的含量,先把这些RNA进行1.5%甲醛琼脂糖凝胶电泳,接着将凝胶中的RNA转移到硝酸纤维纸上,与经过缺口翻译标上^(32)p的MS3质粒杂交。根据通过放射自显影显示的杂交信号,我们证明在代表已分化细胞的TDM1(滋养母细胞瘤)细胞的细胞质中不能查到MS3 RNA,但在代表未分化细胞的二种胚胎癌细胞株PCC_(3)和F_(9)细胞的细胞质中,MS3 RNA不仅存在于多核糖体组份中也存在于次多核糖体组份中。通过对放射自显影底片的分光光度扫描,估计MS3 RNA的大约20—55%分布在多核糖体结构中。
