干扰泛素结合酶E2T小干扰RNA对乳腺癌细胞增殖 凋亡及侵袭的影响

目的探讨干扰泛素结合酶E2T(UBE2T)表达对乳腺癌细胞增殖、凋亡及侵袭过程的影响,为乳腺癌治疗靶标提供理论依据。方法采用脂质体Lipofectamin 2000介导的方法将UBE2T小干扰RNA(UBE2T siRNA)转染乳腺癌细胞株MCF-7,通过用细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)法检测UBE2T沉默对MCF-7细胞增殖能力的影响,采用Annexin V/PI双染流式细胞术检测UBE2T沉默对细胞凋亡的影响,采用Transwell小室法检测UBE2T沉默对MCF-7细胞迁移及侵袭能力的影响,通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)及免疫印迹(Western-blot)法检测UBE2T及AKT/GSK3β/β-catenin通路相关蛋白表达变化。结果CCK-8实验显示,与空白组、UBE2T NC组相比,UBE2T siRNA组转染48 h后OD值显著降低UBE2T siRNA组细胞凋亡率显著升高,UBE2T siRNA组侵袭、迁移细胞数显著降低,增殖相关蛋白Ki-67、间质细胞标志蛋白Vimentin蛋白、AKT/GSK3β/β-catenin通路相关蛋白p-AKT/AKT、p-GSK3β/GSK3β、β-catenin蛋白表达显著降低,上皮细胞标志蛋白E-cadherin蛋白、促凋亡蛋白Bax表达显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论UBE2T-siRNA可降低乳腺癌细胞增殖、侵袭、迁移能力,增强其凋亡能力,可能通过抑制AKT/GSK3β/β-catenin活化实现。