蒙药古日古木——13含药血清通过Akt途径抑制肝癌细胞的增殖探析

目的 探讨蒙药古日古木—13中的有效成分对HepG2肝癌细胞的增殖迁移的抑制及其作用机制。方法20只Wistar大鼠按照随机数表法分为空白、低、中、高剂量药物组,每日一次进行灌胃,一周后心尖取血,制备含药血清完成培养基处理HepG2肝癌细胞,利用IncuCyteZoom动态细胞成像系统筛选含药血清作用最适浓度,选择最适浓度的含药血清作用于划痕处理的细胞,观察其迁移情况。通过网络药理学确定药物成分和疾病的共同蛋白,确定关键作用通路。蛋白免疫印迹检测Akt、p-Akt、mTOR、P-mTOR蛋白表达。结果 IncuCyte分析结果显示中浓度的含药血清对HepG2增殖抑制最明显。IncuCyte显示细胞划痕后,中浓度组含药血清处理的肝癌细胞迁移率下降,组间差异有统计学意义(P<0.05),抑制HepG2增殖。利用数据库筛选药物成分和疾病的共同靶点,Cytoscape平台分析出关键交叉蛋白是Akt,最后通过KEGG富集分析获得关联度较高的Akt相关信号通路。Western blot结果显示中浓度含药血清作用HepG2肝癌细胞48 h后可以下调Akt、p-Akt、mTOR、P-mTOR蛋白表达量,组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论 经研究发现,蒙药古日古木-13有效成分对HepG2肝癌细胞的增殖和迁移都有抑制作用,作用时间在48 h开始明显,Akt是最关键的蛋白靶点。