健脾益气方对腹膜透析大鼠腹膜间皮细胞自噬及上皮间质转化的影响

Effect of Jianpi Yiqi prescription on autophagy and epithelial-mesenchymal transition of peritoneal mesothelial cells in peritoneal dialysis rats

目的:探讨健脾益气方调控腹膜透析(PD)大鼠腹膜间皮细胞(PMC)自噬及上皮间质转化(EMT)的作用机制。方法:将70只无特定病原体动物(SPF)级雄性SD大鼠随机分为中药高剂量组、中药低剂量组、西药组、模型组、假手术组,每组14只。除手术组不切除肾脏只剥离肾脏包膜外,其余各组大鼠均行5/6肾切除,并采取腹腔注射4.25%腹膜透析液复制腹膜纤维化模型。造模成功后,中药高、低剂量组采用健脾益气方灌胃,西药组采用阿托伐他汀钙片灌胃,模型组、假手术组采用0.9%氯化钠注射液灌胃。给药4周后,光镜下观察大鼠PMC结构,测量腹膜厚度;电镜下观察大鼠PMC超微结构;免疫组织化学法及蛋白质印迹法检测微管相关蛋白轻链3-Ⅱ(LC3-Ⅱ)、Beclin-1、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、上皮钙黏素(E-cadherin)表达。结果:与假手术组比较,模型组PMC自噬体数量明显减少,自噬水平下调,大鼠腹膜致密层厚度及LC3-Ⅱ、Beclin-1、α-SMA表达水平均升高(P<0.05),E-cadherin表达水平均降低(P<0.05)。与模型组比较,西药组、中药高剂量组、中药低剂量组PMC中自噬体数量明显减少,自噬水平下调,大鼠腹膜致密层厚度及LC3-Ⅱ、Beclin-1、α-SMA表达水平均降低(P<0.05),E-cadherin表达水平均升高(P<0.05)。与模型组、西药组、中药低剂量组比较,中药高剂量组PMC中自噬体数量明显减少,自噬水平明显下调,大鼠腹膜致密层厚度及LC3-Ⅱ、Beclin-1、α-SMA表达水平均降低(P<0.05),E-cadherin表达水平均升高(P<0.05)。结论:健脾益气方可干预PD大鼠PMC的EMT进程,作用机制可能与干预PMC自噬水平有关。