甘松饮含药血清干预高糖诱导肾小管上皮细胞自噬-凋亡的分子机制研究

目的:研究甘松饮含药血清对高糖作用下小鼠肾小管上皮细胞(TCMK-1)的作用及相关分子机制。方法:体外培养TCMK-1细胞,加入葡萄糖液模拟高血糖环境,以甘松饮含药血清作为干预药物。实验设计空白对照组、模型组及甘松饮高、中、低剂量含药血清组。经高浓度葡萄糖液和甘松饮干预后,用流式细胞仪检测细胞凋亡、活性氧(ROS)、线粒体膜电位(JC-1);MDC法检测自噬体的形成;Western Blot法检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Caspase-7、Caspase-9及自噬相关蛋白LC3、P62、SGLT2、SIRT1的表达。结果:与模型组比较,甘松饮各组细胞凋亡率、ROS水平及线粒体膜电位下降百分比显著降低,细胞内荧光自噬体形成显著增多,Bcl-2、LC3、SIRT1蛋白表达显著升高,Bax、Caspase-7、Caspase-9、SGLT2、P62蛋白表达显著降低(P<0.05或P<0.01)。结论:甘松饮既能通过降低细胞内ROS及升高JC-1,减少细胞凋亡,对高糖作用下的TCMK-1细胞发挥保护作用;还能通过下调SGLT2、上调SIRT1激活SGLT2-SIRT1信号通路,促进TCMK-1细胞内的自噬,减轻肾脏损伤。