养血软坚胶囊对血管内皮细胞活性和软骨退变作用的分子机制研究

目的观察养血软坚胶囊对病理状态下血管生成活性和软骨退变指标的抑制作用及其相关分子机制。方法分别制备养血软坚胶囊含药血清和空白血清;体外培养人脐静脉内皮细胞Huvec,给与血管内皮生长因子VEGF干预,以促进血管生成活性增加;CCK-8法检测不同浓度梯度为0.1%、1%、5%、10%、20%、30%的空白血清和养血软坚胶囊含药血清对Huvec增殖和活性的影响;光镜下观察空白血清和养血软坚胶囊含药血清对Huvec数量和细胞形态的影响;WB和qPCR检测wnt5a、VEGF、CD31、HDAC4、MMP-13、RunX2、IHH和IL-1β的蛋白和mRNA表达。结果与VEGF组相比,在VEGF基础上空白血清对Huvec增殖无明显影响,差异无统计学意义(P>0.001),而1%~30%养血软坚胶囊含药血清在VEGF基础上可抑制Huvec增殖,差异具有统计学意义(P<0.001),并且10%~30%之间无明显变化,差异无统计学意义(P>0.001);养血软坚胶囊含药血清对VEGF诱导下Huvec细胞生长数量和形态具有抑制作用;养血软坚胶囊含药血清可以增加HDAC4、Wnt5a的蛋白和mRNA的表达,差异具有统计学意义(P<0.001)。抑制VEGF、CD31、MMP-13、RunX2、IHH和IL-1β的蛋白和mRNA的表达,差异具有统计学意义(P<0.001)。结论养血软坚胶囊含药血清对血管生成活性和软骨退变的抑制作用可能与其增加Wnt5a表达引起Wnt信号通路调控异常有关。