基于ROS/TXNIP/NLRP3通路探讨槲皮素对Pg-LPS诱导RAW264.7细胞炎症因子表达的影响

目的探讨槲皮素调控活性氧(ROS)/硫氧还蛋白结合蛋白(TXNIP)/NOD样受体相关蛋白3(NLRP3)信号通路对牙龈卟啉单胞菌脂多糖(Pg-LPS)诱导RAW264.7细胞炎症因子的影响。方法采用1 mg/L Pg-LPS刺激RAW264.7巨噬细胞构建细胞炎症模型,分为对照组、模型组及槲皮素低、中、高剂量组(5、25、50μmol/L),MTT法检测细胞活力,倒置显微镜观察各组细胞形态变化,RT-qPCR法检测炎症因子白细胞介素(IL)-6、IL-1β、TNF-α、诱导型NO合酶(iNOS)、环氧合酶(COX-2)mRNA表达,荧光分光光度计检测细胞中ROS水平,Western blot法检测TXNIP、NLRP3蛋白表达。结果0~50μmol/L槲皮素对RAW264.7细胞活力无明显影响(P>0.05)。与对照组比较,模型组细胞形成伪足所占比例升高(P<0.05),IL-6、IL-1β、TNF-α、iNOS、COX-2 mRNA及TXNIP、NLRP3蛋白表达上调(P<0.05),ROS水平增加(P<0.05);与模型组比较,槲皮素各剂量组细胞形成伪足所占比例降低(P<0.05),IL-6、IL-1β、TNF-α、iNOS、COX-2 mRNA及TXNIP、NLRP3蛋白表达下调(P<0.05),ROS水平减少(P<0.05),并呈剂量依赖性。结论槲皮素可抑制Pg-LPS诱导的RAW264.7细胞炎症因子表达,其机制可能与抑制ROS/TXNIP/NLRP3信号通路活性有关。