基于Keap1/PGAM5/AIFM1介导的氧死亡途径探讨健脾益气化瘀祛痰法对高脂血症大鼠的影响与机制

目的 探讨健脾益气化瘀祛痰法防治血脂异常的可能有效机制。方法 将24只SPF级SD大鼠随机分为空白组、模型组、化瘀祛痰方组(13.846 mg·kg^(-1)·d^(-1)),每组8只。模型组、化瘀祛痰方组采用高脂饲料喂养建立高脂血症模型,造模8周后灌胃给药,化瘀祛痰方组给予化瘀祛痰方进行灌胃,空白组及模型组给予相应体积的生理盐水灌胃。4周后通过全自动生物化学分析仪检测甘油三酯(triglyceride,TG),总胆固醇(total cholesterol,TC),高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein cholesterol,HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)的含量;HE染色观察肝脏组织病理变化;酶联免疫吸附测定(ELISA)检测肝脏组织中活性氧(ROS)、醌氧化还原酶[NAD(P)H quinone dehydrogenase-1,NQO-1]和血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)的含量;Western blotting法与实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测肝脏组织中Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1(kelch-like ECH-associated protein 1,Keap1),核因子E2相关因子2(nuclear factor E2-related factor2,Nrf2),去磷酸化线粒体凋亡诱导因子1(apoptosis inducing factor mitochondria associated 1,AIFM1),磷酸甘油酸变位酶5(phosphoglycerate mutase5,PGAM5)蛋白及mRNA的表达。结果 与空白组相比,模型组大鼠血清TC、TG、LDL-C含量显著升高,HDL-C含量显著降低(P<0.05或P<0.01);肝脏脂肪变性脂肪空泡布满视野,肝细胞体积变大;肝脏组织中ROS含量显著升高,NQO-1和HO-1含量显著下降(P<0.01);肝脏组织中Keap1、AIFM1及PGAM5蛋白和mRNA的表达显著升高、Nrf2蛋白和mRNA的表达显著降低(P<0.01)。化瘀祛痰方可使TC、TG、 LDL-C含量显著降低,HDL-C含量显著升高(P<0.05或P<0.01);脂肪变性程度明显缓解,肝细胞脂肪空泡明显减少;肝脏组织中ROS含量显著降低,NQO-1和HO-1含量显著升高(P<0.05或P<0.01);肝脏组织中Keap1、AIFM1及PGAM5蛋白和mRNA的表达显著降低、Nrf2蛋白和mRNA的表达显著升高(P<0.05或P<0.01)。结论 健脾益气化瘀祛痰法可能通过降低Keap1/PGAM5/AIFM1介导的氧死亡相关通路的表达而减轻脂质沉积及肝脏损伤,从而防治血脂异常。