猪肠道病毒巢式RT-PCR检测方法的建立

猪肠道病毒感染(Porcine enterovirus infection)是由猪肠道病毒(Porcine enterovirus,PEV)所引起的一种危害养猪业的重要传染病。临床表现有猪脑脊髓灰质炎、生殖障碍、下痢、心包炎和心肌炎等。本研究为建立PEV灵敏且准确巢式RT-PCR诊断方法,以猪肠道病毒的标准毒株(Porcine enterovirus 9 strain UKG/410/73)为模板,进行5’-非翻译区基因的RT-PCR扩增和巢式RT-PCR扩增;而后进行敏感性、特异性和临床样品检测等试验。敏感性试验表明,巢式RT-PCR的敏感性是普通RT-PCR的100倍;特异性试验结果显示,建立的PEV巢式RT-PCR诊断方法仅对PEV有效,对其他属病原无交叉反应性;临床试验表明,巢式RT-PCR检测PEV阳性率比RT-PCR检测的阳性率高33%。以上结果表明,本研究建立的PEV巢式RT-PCR方法具有快速、准确、稳定等优点,可为PEV的早期诊断、快速检测、流行病学调查和试验研究等提供有效的技术方法。