2-甲氧基肉桂醛缓解猪IPEC-J2细胞氧化损伤的效果研究

本试验旨在研究2-甲氧基肉桂醛(2-MCA)对猪肠上皮细胞IPEC-J2氧化损伤的保护效果。利用过氧化氢(H2O2)建立IPEC-J2细胞氧化损伤模型;通过CCK8法确定2-MCA缓解H2O2处理后IPEC-J2细胞适宜的浓度与处理时间;随后通过试剂盒法测定细胞上清乳酸脱氢酶(LDH)、应激产物丙二醛(MDA)、氧自由基(ROS)、抗氧化指标总抗氧化能力(T-AOC)、过氧化氢酶(CAT)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)和谷胱甘肽(GSH)活性;通过荧光定量PCR检测IPEC-J2细胞内CAT、GPx-1、HO-1、NQO-1、SOD和Nrf2基因表达量。结果显示:(1) 1 000μmol/L H2O2处理4 h时,细胞存活率为50%左右,细胞上清LDH活性增加(P<0.01),表明氧化应激模型建立成功;(2) 12、24、48 h时2.5~40μmol/L 2-MCA处理细胞均可缓解H2O2引起的存活率降低,其中10μmol/L浓度24 h保护效果最佳,此时细胞上清LDH活性降低(P<0.01);(3)与H2O2处理组相比,2-MCA预处理可缓解H2O2引起的MDA和ROS增高(P<0.01);(4)与H2O2组相比,2-MCA预处理可降低T-AOC和CAT含量(P<0.01或P<0.05),增加GSH含量(P<0.01);(5) 2-MCA预处理可降低H2O2处理IPEC-J2细胞Gpx-1和HO-1基因表达量(P<0.01或P<0.05),增高SOD、CAT、NQO-1和Nrf2基因相对表达量(P<0.01或P<0.05)。由上述结果可知,2-MCA能够通过调节Nrf2信号通路及其下游抗氧化酶基因的表达从而降低细胞内应激产物的生成,缓解H2O2诱导引起的IPEC-J2细胞氧化损伤。