石南藤镇痛活性部位筛选及其纯化

目的筛选石南藤镇痛活性部位,并对其进行纯化。方法采用阳离子树脂富集纯化活性部位,HPLC法测定墙草碱含量。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测醋酸扭体小鼠血清TNF-α、IL-1β、IL-6、PGE2水平。结果墙草碱在0.0198~0.1980 mg/mL范围内线性关系良好(r>0.9999),平均加样回收率为103.09%,RSD为1.75%。最优纯化工艺为取2 BV 0.4 g/mL上样液,以2 BV/h体积流量流过树脂,5 BV 70%乙醇以2 BV/h体积流量洗脱,墙草碱纯度3.52%,得率20.63%,除杂率79.37%。阳离子洗脱液部位可有效减少小鼠疼痛扭体次数,降低1L-1β、TNF-α水平(P<0.01)。结论HPLC法准确稳定,重复性好,阳离子树脂纯化效率高,操作性强,工艺简便,可用于纯化具有镇痛活性的石南藤,其镇痛机制可能与减少炎症因子的释放有关。