杜仲叶提取物通过上调miR-140-5p减轻缺血/再灌注引起的神经细胞损伤

目的探讨杜仲叶提取物对缺血/再灌注引起的神经细胞损伤的影响及可能机制。方法采用体外氧糖剥夺/复氧(OGD/R)法诱导大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤PC12细胞建立损伤模型,采用不同浓度(1、10、100μg/ml)杜仲叶提取物干预。分别用CCK-8、流式细胞仪及Western印迹法检测细胞活力、凋亡及B细胞淋巴瘤-2相关X蛋白(Bax)和活化的半胱天冬酶(Cleaved-caspase)-3蛋白表达;酶联免疫吸附试验检测细胞丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)、肿瘤坏死因子(TNF)-α和白细胞介素(IL)-6;RT-qPCR法检测细胞中miR-140-5p表达。转染miR-140-5p模拟物或抑制剂至PC12细胞,观察miR-140-5p对OGD/R诱导的PC12细胞活力、凋亡、氧化应激和炎症因子表达的影响。结果不同浓度(1、10、100μg/ml)的杜仲叶提取物干预后,OGD/R处理的PC12细胞活力、细胞中SOD和CAT活性及miR-140-5p表达显著升高(P<0.05),而凋亡率、Bax和Cleaved-caspase-3蛋白表达、MDA含量、TNF-α和IL-6表达显著降低(P<0.05)。过表达miR-140-5p后,OGD/R处理的PC12细胞活力及细胞中SOD和CAT活性显著升高(P<0.05),而凋亡率、Bax和Cleaved-caspase-3蛋白表达、MDA含量、TNF-α和IL-6表达显著降低(P<0.05)。敲减miR-140-5p显著降低杜仲叶提取物对OGD/R处理的PC12细胞活力、凋亡、氧化应激及炎症因子表达的影响(P<0.05)。结论杜仲叶提取物可抑制OGD/R诱导的PC12细胞凋亡、氧化应激和炎性因子表达而减轻PC12细胞损伤,其机制与上调miR-140-5p表达有关。