结直肠肿瘤差异表达基因在胃癌中的表达及功能分析

目的 探究外周血结直肠肿瘤差异表达基因(CRNDE)在胃癌(GC)患者与GC细胞系中的表达,并通过体外实验探究CRNDE在GC细胞中的生物学功能。方法 选取116例GC患者(病例组)和100例健康受试者(对照组)为研究对象。通过PCR检测GC组织和外周血CRNDE。体外实验以SGC-7901细胞为研究对象,评价pCDNA-CRNDE或si-CRNDE介导的CRNDE上调或敲低对细胞增殖和凋亡的影响。采用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)法评估细胞活力;用Transwell法进行迁移和侵袭测定;用流式细胞术检测细胞周期和凋亡情况。通过分离血浆外泌体,并将其与GC细胞共培养进一步研究外泌体介导的CRNDE的作用。结果 与对照组相比,病例组血浆中CRNDE上调,差异有统计学意义(P <0.05)。此外,血浆和组织中CRNDE的表达水平呈正相关(r=0.726,P <0.05)。CRNDE的表达与肿瘤大小、TNM分期、淋巴结转移、浸润深度和远处转移相关,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,si-CRNDE组细胞的增殖率降低,差异有统计学意义(P<0.05);而pCDNA-CRNDE组细胞的增殖率提高,差异有统计学意义(P <0.05)。CRNDE敲除导致SGC-7901细胞的G1期细胞周期停滞,并且细胞的凋亡分数增加,差异有统计学意义(P <0.05);而CRNDE过表达提高了SGC-7901细胞的S期百分比,降低了G0/G1期百分比,差异有统计学意义(P <0.05),并且细胞凋亡减少,差异有统计学意义(P <0.05)。用GC患者的外泌体治疗可提高SGC-7901细胞活力、克隆形成、迁移和侵袭的能力,差异有统计学意义(P <0.05)。结论 CRNDE在GC患者血清外泌体中表达上调,并能将CRNDE转移到GC细胞中,以增强其增殖和迁移能力。