探讨提高石蜡样本荧光原位杂交重复检测成功率的方法

目的探讨石蜡包埋样本荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)检测失败的原因,并分析FISH检测失败与样本来源、探针种类、实验条件的相关性,以提高石蜡样本FISH重复检测的成功率。方法收集12709例石蜡检测样本,对其中首次检测失败的512例样本,采取更换蜡块或改变实验条件的方法进行重复实验,统计重复实验前后FISH检测结果。结果总体检测重复率为4.03%(512/12709),包括信号微弱无法判读58.59%(300/512),完全无信号41.41%(212/512)。其中本院样本195例(2.89%,195/6753),会诊样本317例(5.32%,317/5956)。按照样本来源分类,检测重复率较高的组织分别为软组织(4.41%)、肺(4.20%)、乳腺(4.18%)、淋巴(4.16%)、头颈部(4.03%)、胃(3.69%)、神经(2.88%)。样本来源及探针种类间的检测重复率差异无统计学意义(P>0.05)。重复检测后,186例(36.33%)样本检测成功,其中更换蜡块和改变实验条件的成功率分别为60.75%和29.88%(P<0.05)。结论石蜡样本FISH检测重复率与样本的前处理和实验操作相关,与组织学类型和探针类型无关,采取更换蜡块的方式重复实验可有效提高FISH二次检测的成功率。