miR-30b靶向Beclin1参与慢性肾脏病血管钙化

目的 探究miR-30b在慢性肾脏病(CKD)大鼠血管钙化(VC)中的作用及miR-30b与自噬基因Beclin1的靶向关系。方法 将SD雄性大鼠随机分成对照组、模型组(CKD)、miR-30b组(CKD+miR-30b模拟物)和miR-30b阴性对照(NC)组(CKD+miR-30b NC)。使用全自动生化分析仪检测血清中血尿素氮(BUN)、血钙(Ca)、血磷(P)、血肌酐(Scr)的含量;苏木素-伊红(HE)染色观察肾组织和肾主动脉组织的病理学变化;茜素红染色观察主动脉钙化结节情况;使用试剂盒检测血管壁钙含量及碱性磷酸酶(ALP)水平;反转录荧光定量(qRT)-聚合酶链反应(PCR)检测主动脉miR-30b水平;Western印迹检测主动脉中Beclin1和LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白相对表达水平;透射电镜观察血管平滑肌细胞(VSMC)中自噬小体的变化;双荧光素酶测定miR-30b与Beclin1的靶向关系。结果 与对照组相比,模型组肾小球萎缩,间质增宽,肾小管扩张严重,炎性细胞浸润严重,血清中BUN、Ca、P、Scr水平、主动脉钙含量及ALP水平显著升高(P<0.05),自噬小体数量、miR-30b相对表达水平及Beclin1、LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。与模型组和miR-30b NC组相比,miR-30b组肾组织损伤明显减轻,血清中BUN、Ca、P、Scr水平、主动脉钙含量及ALP水平显著降低(P<0.05),细胞的自噬小体数量及Beclin1和LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。结论 miR-30b可通过靶向Beclin1对CKD大鼠的血管钙化起到保护作用。