人参皂苷Rg3对血管紧张素Ⅱ诱导小鼠心肌成纤维细胞增殖及胶原合成的影响

目的 研究人参皂苷Rg3对血管紧张素(Ang)Ⅱ诱导的小鼠心肌成纤维细胞(CFs)增殖与胶原合成的影响,探讨人参皂苷Rg3是否具有对抗心肌纤维化的作用。方法 用胰酶消化,差速贴壁、分离纯化CFs,用波形蛋白(Vimentin)免疫荧光法鉴定CFs;建立AngⅡ诱导的CFs增殖模型。实验分为正常对照组(无血清DMEM),模型组(AngⅡ),人参皂苷Rg3组共3组;人参皂苷Rg3预处理1 h,加入AngⅡ共同作用24 h,采用EdU试剂盒检测CFs的增殖情况;羟脯氨酸法检测细胞胶原分泌水平;Western印迹检测CFs中增殖细胞核抗原(PCNA)、胶原蛋白(Col)Ⅰ的表达情况。结果 成功提取新生大鼠原代CFs, Vimentin显著阳性;与正常对照组比较,模型组CFs增殖和胶原分泌明显增加,PCNA、ColⅠ蛋白表达水平明显升高;与模型组相比,人参皂苷Rg3组CFs增殖和胶原分泌水平较明显降低,PCNA、ColⅠ蛋白表达水平明显降低。结论 人参皂苷Rg3通过抑制AngⅡ诱导的CFs增殖和胶原蛋白合成,进而发挥抗心肌纤维化作用。