化痰祛瘀法中药调控lncRNA-TUG1防治动脉粥样硬化的机制研究

目的:观察化痰祛瘀法中药复方血管软化丸抗动脉粥样硬化的作用机制是否与靶向调控长链非编码RNA-TUG1(lncRNA-TUG1)影响p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)信号通路有关。方法:60只载脂蛋白E基因敲除(ApoE^(-/-))小鼠按随机数字表法分为模型组、lncRNA-TUG1拮抗剂组、化痰祛瘀法高剂量组、化痰祛瘀法低剂量组。连续干预8周后检测小鼠血清胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平;苏木精-伊红(HE)染色观察各组病理变化;酶联免疫吸附法(ELISA)检测外周血血清中细胞间黏附分子(ICAM-1)、血管细胞黏附分子(VCAM-1)、白细胞介素-8(IL-8)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)等炎症相关分子水平;逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测各组小鼠主动脉lncRNA-TUG1、ICAM-1和VCAM-1的相对表达量;蛋白质免疫印迹法(Western Blot)检测各组小鼠主动脉T-p38和p-p38的相对表达量。结果:与模型组比较,化痰祛瘀法低剂量组和高剂量组TC、TG、LDL-C水平明显降低,HDL-C水平明显升高(P<0.05);与lncRNA-TUG1拮抗剂组比较,化痰祛瘀法低剂量组和高剂量组TC、TG、LDL-C水平明显降低,HDL-C水平明显升高(P<0.05)。与模型组比较,lncRNA-TUG1拮抗剂组、化痰祛瘀法低剂量组、化痰祛瘀法高剂量组管腔面积(LA)增大,内膜厚度(IMT)、斑块面积(PA)、纤维肌性成分(FS)、脂质中心面积(CA)、最小纤维帽厚度(FCT)减小(P<0.05);与lncRNA-TUG1拮抗剂组比较,化痰祛瘀法低剂量组和化痰祛瘀法高剂量组LA增大,IMT、PA、FS、CA、FCT减小(P<0.05)。与模型组比较,lncRNA-TUG1拮抗剂组、化痰祛瘀法低剂量组和化痰祛瘀法高剂量组小鼠外周血清ICAM-1、VCAM-1、IL-8和MCP-1水平明显降低(P<0.05)。与模型组比较,lncRNA-TUG1拮抗剂组、化痰祛瘀法低剂量组和化痰祛瘀法高剂量组小鼠主动脉中lncRNA-TUG1、ICAM-1、VCAM-1 mRNA表达水平及T-p38、p-p38蛋白表达水平明显降低(P<0.05);与lncRNA-TUG1拮抗剂组比较,化痰祛瘀法低剂量组和高剂量组lncRNA-TUG1、ICAM-1、VCAM-1 mRNA表达水平及T-p38、p-p38蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。病理检测显示,lncRNA-TUG1拮抗剂、化痰祛瘀法低剂量和高剂量均具有明显的防治动脉粥样硬化作用。结论:化痰祛瘀法防治动脉粥样硬化的分子机制可能与靶向调控lncRNA-TUG1抑制p38MAPK信号通路活化及其下游信号T-p38、p-p38表达,抑制炎性反应,调控血脂,保护血管内皮损伤有关。