基于Notch2/TGF-β1通路探讨针刀疗法对颈椎病兔颈后肌纤维化的影响

Effect of Acupotomy on Fibrosis of Cervical Posterior Muscle in Rabbits with Cervical Spondylosis Based on Notch2/TGF-β1 Pathway

目的 基于Notch2/TGF-β1信号通路观察针刀疗法对颈型颈椎病家兔颈后肌纤维化的影响,探讨针刀治疗颈型颈椎病的分子机制。方法 12只新西兰兔适应性喂养1周,采用随机数字表法分为空白组、模型组和针刀组,每组4只。空白组予正常饲养,不做任何造模和干预;针刀组和模型组采用长期低头位法建立兔颈型颈椎病动物模型。模型建立后模型组不进行干预,针刀组基于弓弦网眼理论应用针刀松解颈后肌,每周1次,共干预4次。超声多模态评估3组家兔颈后肌形态学和弹力变化;HE和Masson染色观察颈后肌组织病理变化;qPCR检测颈后肌组织神经源性位点缺口同源蛋白2(Notch2)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原蛋白(Collagen I)mRNA表达水平;Western blot法检测颈后肌组织Notch2、TGF-β1、α-SMA、CollagenⅠ蛋白表达量。结果 超声结果显示,模型组颈后肌超声声像肌纤维排列紊乱,肌束膜、肌外膜轮廓模糊,弹性成像为高弹性图;针刀组颈后肌超声声像为肌纤维排列、肌束膜和肌外膜轮廓趋于正常,弹性成像为中弹性图。HE和Masson染色结果显示,与正常组比较,模型组肌组织内髓核固缩,纤维环较对照组粗糙,排列杂乱,胶原纤维肿胀呈玻璃样变性甚至断裂,可见大量炎性细胞浸润及纤维组织增生等改变;与模型组比较,针刀组肌组织纤维环排列有序,胶原纤维无明显肿胀破坏,炎性细胞浸润和纤维组织增生显著缓解。与正常组比较,模型组Notch2、TGF-β1、α-SMA、Collagen I mRNA表达水平和蛋白表达量均明显提高(P<0.05);与模型组比较,针刀组Notch2、TGF-β1、α-SMA、Collagen I mRNA表达水平和蛋白表达量均明显降低(P<0.05)。结论针刀疗法可有效改善颈椎病家兔颈后肌纤维化损伤,其机制可能通过调控Notch2/TGF-β1信号通路参与。