LncRNA H19介导TSPAN9/ITGB1基因对食管癌细胞生物活性的作用机制

目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)H19介导TSPAN9/ITGB1基因对食管癌细胞生物活性的作用机制。方法检测不同食管鳞癌细胞株中LncRNA H19水平。将食管癌KYSE30细胞分为EC组(无转染食管癌细胞株),NC组(食管癌细胞转染si-NC),干扰组(食管癌细胞转染LncRNA H19-siRNA)。聚合酶链反应(PCR)检测证实LncRNA H19转染成功后,采用噻唑蓝(MTT)、流式细胞仪、Transwell小室及划痕实验检测KYSE30生物活性,采用Western印迹及PCR检测时增加干扰Ⅱ组(干扰组上+TSPAN9模拟物+ITGB1-siRNA),检测TSPAN9/ITGB1蛋白及mRNA相对表达。结果在不同食管癌细胞株中均能够检测出LncRNA H19相对表达,在KYSE30食管癌细胞株中表达最高,选择KYSE30细胞进行后续实验;NC组和EC组KYSE30中LncRNA H19表达比较无显著差异(P>0.05),干扰组明显低于EC组、NC组(P<0.05);各组KYSE30在0 h及24 h时细胞增殖比较无显著差异(P>0.05),从48 h时起干扰组增殖抑制逐渐升高,与EC组、NC组比较,增值明显降低(P<0.05);NC组和EC组KYSE30细胞凋亡率比较无显著差异(P>0.05),干扰组凋亡率明显高于EC组、NC组(P<0.05);NC组和EC组KYSE30细胞侵袭、迁移数目比较无显著差异(P>0.05),干扰组细胞侵袭、迁移数目明显低于EC组、NC组(P<0.05);EC组和NC组TSPAN9/ITGB1蛋白及mRNA比较均无显著差异(P>0.05),干扰组与NC组比较存在显著差异(P<0.05),干扰Ⅱ组与干扰组比较存在显著差异(P<0.05)。结论LncRNA H19在食管癌KYSE30细胞中表达较高,转染LncRNA H19-siRNA后KYSE30细胞生物活性降低,作用机制与激活TSPAN9、抑制ITGB1表达相关。