苦参素干预AKT/mTOR通路调节记忆性B细胞治疗溃疡性结肠炎作用机制研究

目的探讨苦参素(Oxymatrine,OMT)对葡聚糖硫酸钠(Dextran Sulfate Sodium,DSS)诱导的结肠炎小鼠的记忆性B细胞分化及其可能的作用机制。方法将40只SPF级BALB/c雄性小鼠随机均等分成四组:正常组、模型组、治疗组、阴性对照组。模型组、治疗组小鼠自由饮水法饮用DSS溶液诱导小鼠结肠炎模型,观察小鼠临床症状,体质量、结肠质量、结肠质量指数、结肠长度及单位结肠质量指数等情况;HE染色后进行病理损伤评分;流式细胞术检测小鼠外周血中记忆性B细胞:CD19^(+)CD27^(+)IgG^(+)、CD19^(+)CD27^(+)IgM^(+)、CD19^(+)CD27^(+)FCRL5^(+)、CD19^(+)CD27^(+)CXCR3^(+)、CD19^(+)CD27^(+)CD38^(+)记忆性B细胞水平和CD19^(+)CD27^(+)CD103^(+)、CD19^(+)CD27^(+)IL-10^(+)、CD19^(+)CD27^(+)IgA^(+)记忆性调节性B细胞(Regulatory B cells,Breg cells)水平;Western blot法分析结肠组织中AKT/mTOR信号通路相关分子的表达水平。结果与模型组相比,治疗组小鼠在给药治疗后体质量明显增重,结肠长度明显增长,结肠质量、结肠质量指数、单位结肠质量指数及病理组织学评分显著下降(P<0.05或P<0.01);同时,经苦参素治疗后,结肠炎小鼠外周血中CD19^(+)CD27^(+)IgG^(+)、CD19^(+)CD27^(+)IgM^(+)、CD19^(+)CD27^(+)FCRL5^(+)、CD19^(+)CD27^(+)CXCR3^(+)、CD19^(+)CD27^(+)CD38^(+)的记忆性B细胞水平下降和CD19^(+)CD27^(+)CD103^(+)、CD19^(+)CD27^(+)IL-10^(+)、CD19^(+)CD27^(+)IgA^(+)记忆性Breg细胞水平升高。各治疗组结肠组织中ICOS、p-AKT和mTOR等蛋白表达水平有所降低(P<0.05或P<0.01)。结论苦参素有效治疗小鼠结肠炎,可能与其抑制AKT/mTOR信号活化调节记忆性B细胞亚群平衡密切相关。