黄芪通过mTOR通路调控细胞自噬减轻哮喘寒饮蕴肺证大鼠气道炎症的机制研究

目的研究黄芪干预细胞自噬拮抗支气管哮喘寒饮蕴肺证大鼠气道炎症的作用机制。方法将Wistar雄性大鼠随机分为空白组、模型组、黄芪组,每组12只。采用卵清蛋白致敏,利用冰箱冰冻给予寒冷刺激、冰水喂养给予饮冷刺激以及让大鼠在水中游泳直至其即将沉入水中、难以上浮使其劳累等方法,构建支气管哮喘寒饮蕴肺证的病证结合大鼠模型,并给予黄芪配方颗粒进行治疗,观测相关指标的表达情况。肺功能仪检测大鼠肺功能状况,苏木素-伊红染色观察大鼠肺部组织结构变化,酶联免疫法检测大鼠血清中白细胞介素-13(IL-13)、人源γ干扰素(IFN-γ)水平,通过实时荧光定量PCR法检测ATG 3和ATG 7 mRNA表达水平,Western blot法检测p-mTOR、mTOR、Beclin 1、LC-3蛋白表达水平,通过自噬电镜观察肺组织中自噬小体。结果与空白组相比,模型组大鼠吸气阻力(Ri)、呼气阻力(Re)均明显增加(P<0.01),肺动态顺应性(Cldyn)显著降低(P<0.01);IL-13表达量显著增高(P<0.01),IFN-γ表达显著降低(P<0.01);肺泡内大量炎性细胞浸润;肺组织中ATG 3和ATG 7 mRNA的表达量降低;自噬标志蛋白LC3-Ⅰ向LC3-Ⅱ转化减少,mTOR通路的表达显著增高,Beclin1表达显著降低。与模型组相比,大鼠给予黄芪治疗后,肺功能各指标均有明显改善,肺组织炎症损伤降低,可见少量自噬小体,ATG 3和ATG 7 mRNA的表达量显著升高(P<0.01),mTOR信号通路的激活可有效的被抑制。结论黄芪在支气管哮喘寒饮蕴肺证的治疗中确有较好的治疗效果,其作用机制可能通过抑制肺组织自噬相关mTOR信号通路的表达,增加自噬基因ATG的表达,以提高自噬活性,减轻气道炎症水平。