橘红素对大鼠成骨细胞增殖、分化和成骨功能的影响

目的研究橘红素(TG)对体外培养大鼠成骨细胞增殖、分化、矿化和成骨功能指标基因蛋白表达的影响。方法选取出生24 h内的SD大鼠乳鼠颅骨,通过酶消化法培养原代成骨细胞,倒置显微镜下观察细胞形态和状态,并以碱性磷酸酶(ALP)染色和茜素红(ARS)染色法进行细胞鉴定;分别采用噻唑蓝(MTT)法、ALP染色法、ARS染色法检测TG对原代成骨细胞的存活率、评价成骨细胞分化能力和矿化能力的影响;采用Western印迹检测TG对原代成骨细胞成骨相关转录因子(OSX)、ALP、Ⅰ型胶原蛋白(CollagenⅠ)和骨桥蛋白(OPN)等成骨功能指标基因的蛋白表达。结果与Control组相比,TG作用浓度为5、10、15、20μmol/L时可明显促进成骨细胞的增殖(P<0.01);TG共培养7 d后,与Control组比较,TG作用浓度为5、10、15、20μmol/L时ALP染色明显增加,说明TG能明显促进成骨细胞分化(P<0.05);TG共培养21 d后,与Control组比较,TG浓度为5、10、15、20μmol/L时ARS染色明显增加,说明TG能明显促进成骨细胞的矿化功能(P<0.05)。Western印迹检测结果表明,TG可提高成骨功能指标基因CollagenⅠ、ALP和OPN蛋白表达,其中以10μmol/L TG时最显著(均P<0.05)。结论TG能显著提高原代培养的大鼠成骨细胞的增殖、分化和矿化能力,并显著提高成骨功能指标基因的蛋白表达。