龙胆苦苷通过调控miR-218表达减轻高糖诱导的小鼠肾脏足细胞损伤

目的探讨龙胆苦苷(GPS)对高糖诱导的小鼠肾脏足细胞(MPC5)损伤的影响及其可能的作用机制。方法高糖诱导MPC5细胞建立细胞损伤模型(HG组),正常培养的MPC5细胞记为Con组,用不同剂量(8、40、200μg/μl)GPS处理高糖诱导的MPC5细胞(HG+GPS-L组、HG+GPS-M组、HG+GPS-H组),anti-miR-NC、anti-miR-218转染至MPC5细胞后加入30 mmol/L D-葡萄糖处理24 h(HG+anti-miR-NC组、HG+anti-miR-218组),miR-NC、miR-218 mimics分别转染至MPC5细胞后加入200μg/μl GPS与30 mmol/L D-葡萄糖共同处理24 h(HG+GPS+miR-NC组、HG+GPS+miR-218组);流式细胞术检测细胞凋亡率;qRT-PCR法检测miR-218相对表达量;Western印迹法检测肾素(nephrin)、足突蛋白(podocin)、剪切的胱天蛋白酶(cleaved-caspase)3、cleaved-caspase9蛋白相对表达量。结果HG组nephrin、podocin蛋白表达显著低于Con组,细胞凋亡率、cleaved-caspase3、cleaved-caspase9蛋白表达显著高于Con组,miR-218相对表达量显著高于Con组(均P<0.05);HG+GPS-L组、HG+GPS-M组、HG+GPS-H组nephrin、podocin蛋白表达显著高于HG组,细胞凋亡率、cleaved-caspase3、cleaved-caspase9蛋白表达显著低于HG组,miR-218相对表达量显著低于HG组,且呈剂量依赖性(P<0.05);HG+anti-miR-218组nephrin、podocin蛋白表达显著高于HG+anti-miR-NC组,细胞凋亡率、cleaved-caspase3、cleaved-caspase9蛋白表达显著低于HG+anti-miR-NC组(均P<0.05);HG+GPS+miR-218组nephrin、podocin蛋白表达显著低于HG+GPS+miR-NC组(P<0.05),细胞凋亡率、cleaved-caspase3、cleaved-caspase9蛋白表达显著高于HG+GPS+miR-NC组(均P<0.05)。结论GPS可通过抑制miR-218的表达而促进nephrin、podocin表达及抑制细胞凋亡从而减轻高糖诱导的小鼠肾脏足细胞损伤。