60例高危型HPV感染藏族妇女阴道菌群分析

目的分析60例高危型人乳头瘤病毒(HPV)感染藏族妇女阴道菌群变化。方法选择藏族妇女209例,根据高危型HPV检测结果分为宫颈高危型HPV阳性60例(观察组)、宫颈高危型HPV阴性149例(对照组)。收集宫颈口及宫颈管脱落的上皮细胞,行宫颈液基细胞学(TCT)检查,对宫颈病变进行细胞学分类诊断。采集并提取阴道分泌物DNA,使用带Barcode的特异引物806R和338F进行高效、高保真PCR扩增,构建DNA文库,利用Illumina MiSeq测序技术对PCR扩增产物进行测序;采用Uparse软件进行物种分类,以Mothur方法进行物种注释,采用Alpha多样性分析阴道菌群多样性(Chao指数)和丰富度(Shannon指数);按照rRNA基因数据库进行门与属水平的物种分类,计算菌群相对丰度;采用线性判别分析效应量软件分析组间相对丰度比较有统计学差异的菌群。采集阴道分泌物,离心留取上清液,采用ELISA法检测炎症因子IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α。结果对照组TCT检查未见宫颈病变,观察组存在11种高危型HPV亚型,TCT检查均存在宫颈病变,其中无明确诊断意义的不典型鳞状细胞20例、不能排除高级别鳞状上皮内病变的不典型鳞状细胞16例、低级别鳞状上皮内病变10例、高级别鳞状上皮内病变10例、鳞状细胞癌4例。在门水平上,观察组与对照组阴道分泌物相对丰度>1%的阴道菌群均有五个菌门,分别为厚壁菌门、放线菌门、拟杆菌门、梭杆菌门、变形菌门,其中观察组厚壁菌门相对丰度显著低于对照组,变形菌门相对丰度显著高于对照组(P均<0.05)。在属水平上,对照组阴道分泌物相对丰度>1%的阴道菌群主要有乳杆菌属、加德纳菌属、普氏菌属、梭菌属、奇异菌属五个菌属,观察组阴道分泌物相对丰度>1%的阴道菌群主要有乳杆菌属、加德纳菌属、奇异菌属、普氏菌属、假单胞菌属、梭菌属六个菌属,其中观察组奇异菌属和假单胞菌属相对丰度显著高于对照组,梭菌属菌群相对丰度显著低于对照组(P均<0.05)。观察组阴道分泌物Chao指数显著高于对照组,Shannon指数显著低于对照组(P均<0.05)。观察组阴道分泌物炎症因子IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α水平均显著高于对照组(P均<0.05)。结论高危型HPV感染藏族妇女阴道分泌物菌群发生明显变化,主要表现为厚壁菌门、变形菌门以及乳酸菌属、奇异菌属失调,阴道菌群丰富度增加、多样性减少,并且阴道分泌物中炎症因子水平明显升高。