体外培育牛黄对脑缺血再灌注损伤大鼠的保护作用

目的观察体外培育牛黄对脑缺血再灌注损伤大鼠的保护作用。方法采用改良线栓法制备短暂大脑中动脉阻塞(tMCAO)模型,大鼠随机分为假手术组、模型组、溶剂组、尼莫地平组及体外培育牛黄0.20、0.10、0.05 g/kg组,每组12只。术后72 h,评价神经功能和脑梗死体积,HE染色观察脑组织病理损伤情况,ELISA法检测大鼠血清VEGF、Ang-1、bFGF水平,分子对接预测其可能机制,Western blot、免疫组化(IHC)法检测p-PI3K、p-Akt、caspase-3、Bcl-2、Bax蛋白表达,RT-qPCR法检测PI3K、Akt、caspase-3、Bax、Bcl-2 mRNA表达。结果与溶剂组比较,体外培育牛黄各剂量组大鼠神经功能评分、脑梗死率降低(P<0.05,P<0.01),海马区神经元与皮层的病理损伤改善,血清VEGF、Ang-1水平升高(P<0.05,P<0.01)。牛黄主要成分与PI3K、Akt、caspase-3的对接得分大于100分,契合良好。体外培育牛黄能升高p-PI3K、p-Akt、Bcl-2蛋白及mRNA表达(P<0.05,P<0.01),降低caspase-3、Bax蛋白及mRNA表达(P<0.05,P<0.01)。结论体外培育牛黄可能通过激活PI3K/Akt通路对脑缺血再灌注损伤大鼠起到神经保护作用。