基于Nox4/NLRP3通路探讨桃叶珊瑚苷干预动脉粥样硬化的作用机制

目的:探究桃叶珊瑚苷干预动脉粥样硬化大鼠的作用机制。方法:将SD雄性大鼠采用高脂饲料联合维生素D_(3)腹腔注射的方法建立动脉粥样硬化模型。颈动脉超声和苏木精-伊红(HE)染色评估大鼠建模;建模后分为模型组、辛伐他汀组(20 mg/kg)及桃叶珊瑚苷高剂量(40 mg/kg)组、中剂量(20 mg/kg)组、低剂量(10 mg/kg)组,每组8只;另设正常组,8只大鼠给予普通饲料喂养并腹腔注射生理盐水。分组完成后开始给药,辛伐他汀组给予辛伐他汀溶液灌胃,桃叶珊瑚苷各剂量组腹腔注射相应剂量的桃叶珊瑚苷,正常组和模型组灌胃和注射等量的生理盐水,每日1次,连续给药4周。给药结束后,检测大鼠血清三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)以及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素(IL)-18、IL-1β水平;HE染色观察颈动脉组织病理学变化;荧光探针测定颈动脉中活性氧(ROS)的生成;蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测颈动脉组织还原型辅酶Ⅱ氧化酶4(Nox4)/核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)通路相关蛋白的表达。结果:造模大鼠管腔内出现大量动脉粥样硬化病变,颈动脉出现狭窄,局部血管壁上明显有斑块形成,颈动脉内膜中层厚度(IMT)增加,大量炎性因子浸润。与正常组比较,模型组大鼠血清TC、TG、LDL-C、ox-LDL、TNF-α、IL-1β、IL-18水平和颈动脉ROS荧光强度、Nox4、NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、Cleaved Caspase-1的表达明显升高(P<0.05),HDL-C水平明显降低(P<0.05),颈动脉组织内膜层增厚,局部有斑块形成,内皮受损,大量炎性因子浸润;与模型组比较,辛伐他汀组和桃叶珊瑚苷高剂量组、桃叶珊瑚苷中剂量组大鼠血清TC、TG、LDL-C、ox-LDL、TNF-α、IL-1β、IL-18水平和颈动脉ROS荧光强度、Nox4、NLRP3、ASC、Cleaved Caspase-1的表达明显下降(P<0.05),HDL-C水平明显升高(P<0.05),大鼠颈动脉内膜增厚、炎性因子浸润程度减少;且桃叶珊瑚苷高剂量组对Nox4/NLRP3通路的抑制作用以及对颈动脉组织的改善作用与辛伐他汀组接近。结论:桃叶珊瑚苷可调节血脂异常、抑制氧化应激和炎症反应,减轻动脉粥样硬化病变,其作用机制可能与抑制Nox4/NLRP3通路的激活有关。