益景汤对高糖环境中人脑微血管内皮细胞形态和TGF-β1/Smads信号通路相关蛋白表达的影响

Effect of Yijing Decoction on the Morphology of Human Brain Microvascular Endothelial Cells and the Expression of TGF-B1/Smads Signaling Pathway Related Proteins in High Glucose Environment

目的探讨益景汤对高糖环境中人脑微血管内皮细胞(HBMEC)形态及TGF-β1/Smads信号通路相关蛋白表达的影响。方法取对数生长期的HBMEC分为空白组、血清组、模型组、含药组,空白组采用无血清培养基,血清组采用血清培养基,模型组采用40 mmol/L葡萄糖血清培养基,含药组采用益景汤含药血清+40 mmol/L葡萄糖培养基,各培养48 h。采用光镜观察4组细胞形态变化,Western blot检测4组晚期糖基化终末产物特异性受体(RAGE)、转化生长因子β1(TGF-β1)、同源物4重组蛋白(Smad4)以及纤维连接蛋白(fibronectin)、紧密连接蛋白5(claudin-5)、Ⅳ型胶原蛋白(collagenⅣ)的蛋白表达量。结果空白组细胞稀疏,形态尚规则;血清组细胞形态规则,成簇生长,呈“铺路石”单层贴壁生长;模型组细胞不规则增大,细胞间隙增宽、数量变少,细胞碎片、悬浮死细胞增多;含药组细胞不规则形态减少、间隙变小、数量增多,细胞碎片、悬浮死细胞减少。与空白组及血清组比较,模型组claudin-5蛋白表达量均明显降低(P均<0.05),RAGE、TGF-β1、Smad4、fibronectin和collagenⅣ蛋白表达量差异均无统计学意义(P均>0.05);与模型组比较,含药组claudin-5蛋白表达量明显升高(P<0.05),RAGE、TGF-β1、Smad4、fibronectin和collagenⅣ蛋白表达量差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论益景汤能提高高糖环境中HBMEC的增殖活力,保护细胞形态,明显上调HBMEC的claudin-5蛋白表达,对保护人脑微血管正常结构,维持人血脑屏障正常通透性有一定意义。