柚皮素对LPS诱导人脐静脉内皮细胞损伤的保护作用

目的探讨柚皮素对LPS诱导人脐静脉内皮细胞损伤的保护作用及其机制。方法MTT法检测5、20、80、160μmol/L柚皮素对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)活力的影响,以筛选适宜实验剂量。细胞分为对照组、LPS组和5、20μmol/L柚皮素组,MTT法检测细胞活力,ELISA法检测细胞上清液中炎症因子IL-6、TNF-α水平,DCFH-DA染色观察细胞内活性氧(ROS)水平,免疫荧光法观察细胞骨架蛋白及细胞连接蛋白形态变化,Western blot、RT-qPCR法检测细胞ICAM1、VCAM1、p-NF-κB p65蛋白和mRNA表达。结果0~20μmol/L柚皮素对HUVEC细胞无明显的毒副作用。与对照组比较,LPS组细胞活力降低(P<0.01),细胞凋亡率、ROS荧光强度、IL-6和TNF-α水平、ICAM1、VCAM1、p-NF-κB p65蛋白表达升高(P<0.01),细胞骨架蛋白出现聚集,细胞萎缩;与LPS组比较,柚皮素组细胞活力增加(P<0.05),细胞凋亡率、ROS荧光强度、IL-6和TNF-α水平、ICAM1、VCAM1、p-NF-κB p65蛋白表达降低(P<0.01),细胞骨架和连接蛋白破坏得到保护。结论柚皮素对人脐静脉内皮细胞具有保护作用,可减少炎症及氧化应激反应,其作用与调控NF-κB通路有关。