针刺通过恢复Beclin-1和Bcl-2的平衡抑制MCAO/R大鼠细胞凋亡研究

目的通过观察针刺对大脑中动脉阻塞再灌注(MCAO/R)大鼠海马区Beclin-1和Bcl-2表达的影响,探讨针刺降低脑缺血再灌注损伤(CIRI)后细胞凋亡与恢复Beclin-1和Bcl-2平衡有关的机制。。方法80只SD大鼠随机分为正常组(Normal组)、假手术组(Sham组)和造模组。造模组再随机将模型成功大鼠分为模型组(MCAO/R组)、依达拉奉组(ED组)和针刺组(AC组)。AC组针刺大椎、百会、水沟穴进行干预,每12 h1次,共3次;Sham组、MCAO/R组和ED组只捆绑不针刺;其中AC组、MCAO/R组、Sham组大鼠腹腔注射生理盐水(5mg/kg),ED组腹腔注射依达拉奉(5mg/kg),每12h1次,共3次。使用改良Garcia神经功能评分评估神经损伤程度、TTC染色法观察脑梗死体积,免疫组化法检测缺血侧海马组织Bcl-2、Bax表达水平,Western Blot法检测自噬相关蛋白Beclin-1表达,TUNEL染色法检测缺血侧脑组织细胞凋亡。结果再灌注后0 h,与Normal组和Sham组比较,MCAO/R、ED和AC组的Garcia神经功能评分显著降低(P<0.01);再灌注24h后,与MCAO/R组比较,ED组和AC组评分明显升高(P<0.05,P<0.01)。与Normal组和Sham组比较,MCAO/R组的脑梗死体积比显著增加(P<0.01);与MCAO/R组比较,ED组和AC组的脑梗死体积比显著减少(P<0.01,P<0.05)。与Normal组和Sham组比较,MCAO/R组的Bax表达水平、细胞凋亡指数、Beclin-1表达量明显升高(P<0.05、P<0.01、P<0.01);与MCAO/R组比较,AC组的Bax表达水平、细胞凋亡指数、Beclin-1表达量显著降低(P<0.01、P<0.05、P<0.01)。与Normal组和Sham组比较,MCAO/R组的Bcl-2的表达水平明显降低(P<0.01);与MCAO/R组比较,AC组的Bcl-2的表达水平显著升高(P<0.01)。结论针刺能显著改善MCAO/R大鼠神经功能,减小脑梗死体积,降低细胞凋亡率,其机制可能是针刺抑制Beclin-1的过度激活,进而提高Bcl-2的表达水平,通过恢复Beclin-1和Bcl-2的平衡来减少CIRI后的细胞凋亡。