补中益气汤对自身免疫性甲状腺炎小鼠TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路的影响

目的探讨补中益气汤对自身免疫性甲状腺炎(Autoimmune thyroiditis,AIT)小鼠TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路的影响,明确补中益气汤对AIT小鼠的作用机制。方法选取8周龄NOD.H-2h4小鼠60只,雌雄不限,按照体重分层随机分为正常组(ZC组)、模型组(AIT组)、补中益气汤低、中、高剂量组(BG-1组、BG-2组、BG-3组)、西药组(SeG组),每组10只。ZC组饲以蒸馏水,其余各组饲以含0.05%碘化钠水。8周后造模成功,开始灌胃给药,按每公斤体重(g/kg)小鼠的给药量为人的9.1倍计算,BG-1组:4.78 g/kg、BG-2组:9.56 g/kg、BG-3组:19.00 g/kg。ZC组、AIT组灌服等量蒸馏水,SeG组灌服硒酵母混悬液(0.26 mg/kg),灌胃8周后麻醉处死小鼠,取材。HE染色检测甲状腺组织病理变化;ELISA法检测血清TgAb、IL-1β、IL-6、IL-17表达水平;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测小鼠甲状腺TLR4、MyD88、NF-κB、NLRP3、ASC、Caspase-1 mRNA表达水平。结果HE染色显示:与AIT组比较,补中益气汤各剂量组及西药组小鼠甲状腺淋巴浸润与滤泡结构破坏均有明显改善。ELISA法结果表明:与ZC组相比,AIT组小鼠血清TgAb、IL1β、IL-6、IL-17水平显著升高(P<0.05);与AIT组相比,补中益气汤各剂量组小鼠血清TgAb水平较AIT组显著降低,BG-1组、BG-2组小鼠血清IL-1β水平显著降低,BG-1组IL-6水平明显降低,BG-2组、BG-3组IL-17水平显著降低(P<0.05)。与SeG组比较,BG-2组TgAb水平显著降低,结果具有统计学意义(P<0.05)。qRT-PCR结果示:与ZC组相比,AIT组甲状腺组织中TLR4、MyD88、NLRP3、ASC、Caspase-1 mRNA表达显著增高(P<0.01,P<0.001);与AIT组相比,SeG组、补中益气汤各剂量组(BG-1组、BG-2组、BG-3组)小鼠甲状腺组织中TLR4、MyD88、NLRP3、ASC、Caspase-1 mRNA表达显著降低(P<0.01);与SeG组相比,BG-1组TLR4、NLRP3、ASC、Caspase-1 mRNA表达显著增高(P<0.01,P<0.001),BG-3组TLR4、NLRP3 mRNA表达增高(P<0.05,P<0.001)。结论补中益气汤可有效缓解AIT小鼠甲状腺组织炎症细胞浸润状态,该作用可能与抑制TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路激活有关。