乌头汤对白细胞介素-1β诱导的退变软骨细胞外基质稳态的影响

Effects of Wutou Decoction on Extracellular Matrix Homeostasis of Degenerated Chondrocytes Induced by Interleukin-1β

目的 探讨乌头汤对白细胞介素-1β(IL-1β)诱导的退变软骨细胞外基质稳态的影响,为乌头汤的临床应用提供理论依据。方法 选取4周龄SPF级雄性SD大鼠10只,5%异氟醚吸入麻醉后剔取大鼠双膝关节软骨,使用机械-酶消化法分离后培养软骨细胞,并将软骨细胞随机分为空白组、模型组和乌头汤组。空白组使用含10%FBS的DMEM培养基进行培养;模型组采用10 ng/mL IL-1β溶液干预24 h复制退变软骨细胞模型;乌头汤组采用10 ng/mL IL-1β干预24 h后使用150μg/mL乌头汤水提物干预24 h。采用qPCR和Western blot检测3组软骨细胞中基质金属蛋白酶(MMP)-3、MMP-13、含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶(ADAMTS)-4和ADAMTS-5的mRNA相对表达水平和蛋白表达量。结果 与空白组比较,模型组中MMP-3、MMP-13、ADAMTS-4、ADAMTS-5 mRNA相对表达水平和蛋白表达量均明显提高(P均<0.05);与模型组比较,乌头汤组MMP-3、MMP-13、ADAMTS-4、ADAMTS-5 mRNA相对表达水平和蛋白表达量均明显降低(P均<0.05)。结论 乌头汤通过抑制软骨细胞中MMP-3、MMP-13、ADAMTS-4和ADAMTS-5的表达,来维持软骨细胞外基质稳态,延缓骨关节炎软骨退变。