基于CGRP、VIP及SP研究平胃胶囊对肝郁脾虚型IBS-D模型大鼠脑肠肽的影响

目的基于脑-肠轴理论,通过研究肝郁脾虚型腹泻型肠易激综合征((diarrhea-predominant irritable bowel syndrome,IBS-D)大鼠相关脑肠肽因子含量的表达,探讨平胃胶囊改善IBS-D的作用机制。方法将适应性饲养1周后的48只Wistar雄性大鼠,随机分为正常对照组(NC)、模型组(M)、匹维溴铵组(PB)、平胃胶囊低剂量组(PWC-L)、平胃胶囊中剂量组(PWC-M)、平胃胶囊高剂量组(PWC-H)。除正常对照组外,其余大鼠采用乙酸灌肠+夹尾激怒+束缚限制活动+饥饱失常的方法制备肝郁脾虚型IBS-D大鼠模型,连续造模21d。造模成功后以PB(2.5mg/kg)、PWC-L(0.275g/kg)、PWC-M(0.55g/kg)、PWC-H(1.1g/kg)开始灌胃,NC组、M组以1ml/100g生理盐水灌胃,连续14d,2次/d。采用RT-PCR法检测各组结肠组织中降钙素基因相关肽(Calcitonin gene related peptide,CGRP)mRNA、P物质(SubstanceP,SP)mRNA表达;免疫组化法检测各组结肠组织中CGRP、血管活性肠肽(Vaso-active intestinal peptide,VIP)的蛋白含量。结果(1)RT-PCR法检测结果:与NC组比较,M组大鼠结肠组织的CGRP、SP mRNA水平显著升高(P<0.05);与M组比较,PB组、PWC-M、PWC-H组大鼠结肠组织CGRP mRNA水平降低(P<0.05,P<0.01);与M组比较,PB组大鼠结肠组织SP mRNA水平降低(P<0.05);(2)免疫组化法结果:与NC组比较,M组大鼠结肠组织的CGRP、VIP的阳性表达显著增高(P<0.05,P<0.001);与M组比较,各药物干预组大鼠结肠组织的CGRP、VIP的阳性表达显著降低(P<0.05,P<0.01),差异具有统计学意义。结论平胃胶囊改善肝郁脾虚型IBS-D模型大鼠的作用机制可能与降低结肠组织CGRP、SPmRNA水平及CGRP、VIP蛋白水平,调节脑肠肽有关。