“固元扶阳”穴位针刺法对EAE小鼠的影响及机制

目的探讨“固元扶阳”穴位针刺法对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠的疗效及其作用机制。方法选择雌性C57BL/6小鼠44只,采用数字随机表法分为正常对照组、模型对照组、针刺组和激素组。采用主动免疫方法注射MOG35-55抗原建立EAE小鼠模型。免疫第14天开始干预,针刺组给予针刺“大椎”、双侧“肾俞”、双侧“足三里”治疗,每日针刺1次,共14次;激素组按体质量0.1 ml/10 g给予醋酸泼尼松药液灌胃治疗,每日1次,共14次;正常对照组和模型对照组采用同样操作给予生理盐水灌胃处理。免疫第28天结束实验,其间每隔1 d记录小鼠体质量并进行神经功能障碍评分。采用国际通用的Kono5级评分法对各组小鼠神经功能障碍进行评分,采用苏木素-伊红(HE)染色法观察各组小鼠脊髓炎性细胞浸润情况并进行炎症评分,采用劳克坚牢蓝(LFB)染色法观察各组小鼠脊髓L5段髓鞘脱失情况并进行脱髓鞘评分,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组血清细胞因子白细胞介素(IL)-6、IL-17和IL-10的表达水平。结果体质量检测结果显示,针刺干预可以缓解EAE小鼠体质量下降,针刺组体质量显著高于模型对照组(P<0.001)。神经功能评分结果显示,针刺干预可以降低EAE小鼠神经功能评分,针刺组神经功能评分明显低于模型对照组(P<0.001)。病理形态学研究结果显示,与正常对照组比较,模型对照组脊髓组织炎症评分显著升高(P<0.001),而针刺组和激素组脊髓组织炎症评分明显低于模型对照组(P<0.01,P<0.05);与正常对照组比较,模型对照组脊髓L5段可见髓鞘脱失,脱髓鞘评分显著升高(P<0.001),而针刺组和激素组脊髓L5段脱髓鞘评分均明显低于模型对照组(P<0.001,P<0.01)。血清细胞因子检测结果显示,与正常对照组比较,模型对照组血清促炎因子IL-6和IL-17水平显著升高(P<0.001),血清抑炎因子IL-10水平显著降低(P<0.001);与模型对照组比较,针刺组和激素组血清促炎因子IL-6和IL-17水平显著降低(P<0.001,P<0.05),血清抑炎因子IL-10水平显著升高(P<0.001)。结论“固元扶阳”穴位针刺法能明显改善EAE小鼠一般状态和神经功能,其作用机制可能与调节EAE小鼠血清细胞因子水平进而减轻炎症和髓鞘损伤有关。