黄胸蓟马化学感受蛋白基因ThawCSP1克隆与表达分析

Molecular cloning and expression analysis of chemosensory protein gene ThawCSPI from Thrips hawaiensis

化学感受蛋白(chemosensory proteins,简称CSPs)除了具有感知化学分子的功能,还与昆虫个体生长与发育、生殖、杀虫剂抗性等密切相关。黄胸蓟马(Thrips hawaiiensis)广泛分布于亚洲热带、亚热带和北美南部,是一种重要的农业和园艺作物害虫。本研究克隆鉴定了黄胸蓟马化学感受蛋白基因ThawCSP1开放阅读框(ORF),然后利用MEGA 7.0软件以邻接法构建ThawCSP1系统发育树,最后利用RT-qPCR、免疫荧光、免疫电镜技术,从mRNA和蛋白水平分析黄胸蓟马ThawCSP1基因的表达情况。结果表明,黄胸蓟马ThawCSP1基因(GenBank登录号:OQ730210)ORF为405 bp,编码134个氨基酸,预测蛋白分子量为15.181 ku。分子进化树显示ThawCSP1与同属缨翅目的西花蓟马、花蓟马和牛角花齿蓟马CSPs序列同源性分别为79.55%、80.30%、76.52%。ThawCSP1基因在黄胸蓟马各个发育阶段均有表达,其中羽化1、5、10 d的成虫相对表达量最高,其次是1龄、2龄若虫和羽化15 d的成虫,蛹期的表达量最低;在黄胸蓟马成虫不同组织中,ThawCSP1表达量最高的是触角,其次是足和头部,分别是腹部表达量的222.33、181.60、79.03倍。免疫荧光和免疫电镜观察也表明,ThawCSP1蛋白在黄胸蓟马触角高表达。研究结果将为解析ThawCSP1基因功能提供试验依据,也为基于昆虫CSPs研发高效引诱剂提供了理论依据。