脂蛋白相关lncRNA通过参与炎症反应致冠心病血管损伤的机制研究

目的:探讨脂蛋白相关lncRNA通过参与炎症反应导致冠心病血管损伤的作用机制。方法:通过慢病毒来敲低lnc-MICALL2-2,实验分为对照组、氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)组、NC-shRNA+ox-LDL组、sh-MICALL2-2+ox-LDL组。逆转录实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)和荧光原位杂交技术测定lnc-MICALL2-2的表达;细胞计数试剂盒(CCK-8)和流式细胞术检测细胞活力及凋亡率;酶联免疫吸附试验(ELISA)测定细胞培养物上清液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6、IL-10、IL-1β、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)和单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)含量;蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测各组内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、磷酸化eNOS(p-eNOS)、内皮素(ET-1)、Bcl-2、Bax、Caspase-3、单磷酸活化蛋白激酶-α1(AMPKα1)和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶2(NOX-2)的蛋白表达;检测各组活性氧(ROS)水平。结果:lnc-MICALL2-2在ox-LDL诱导的人冠状动脉内皮细胞(HCAECs)损伤模型中表达增加,敲低lnc-MICALL2-2后减弱了ox-LDL对HCAECs增殖和细胞凋亡的影响。ELISA结果表明,敲低lnc-MICALL2-2促炎因子TNF-α、IL-6和IL-1β降低,抗炎因子IL-10表达升高,VCAM-1、ICAM-1、MCP-1水平及eNOS、p-eNOS表达水平下降。同时,敲低lncRNA后,ROS水平和细胞凋亡率也有所下降。结论:lnc-MICALL2-2在冠心病中表达升高,敲低lnc-MICALL2-2后可改善ox-LDL诱导的炎症反应,减少血管内皮细胞损伤。