miR-93-5p对缺氧/复氧H9c2心肌细胞凋亡的作用机制研究

目的:探讨miR-93-5p对缺氧/复氧(H/R)诱导的H9c2心肌细胞凋亡的作用机制。方法:取对数生长期的H9c2心肌细胞用于实验,将细胞分为control组、H/R组、miR-NC组、miR-93-5p mimic组。miR-NC组转染miR-93-5p阴性对照片段50μmol/L,miR-93-5p mimic组转染miR-93-5p模拟物。24 h后,除control组外,H/R组、miR-NC组、miR-93-5p mimic组建立H/R模型。2 h后采用聚合酶链式反应(PCR)法检测心肌细胞中miR-93-5p表达水平,噻唑蓝(MTT)比色法检测心肌细胞存活率,流式细胞仪检测心肌细胞凋亡率,黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶(SOD)活性,硫代巴比妥酸法测定丙二醛(MDA)含量,二硫双硝基苯甲酸定量法检测谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)含量,蛋白免疫印迹法检测活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Cleaved Caspase-3)、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达。结果:与control组比较,H/R组miR-93-5p表达、心肌细胞存活率、SOD和GSH-Px活性、Bcl-2蛋白表达降低,心肌细胞凋亡率、MDA、TNF-α、IL-1β、IL-6、Cleaved Caspase-3和Bax蛋白表达升高,差异均有统计学意义(P<0.05);与H/R组和miR-NC组比较,miR-93-5p mimic组miR-93-5p表达、心肌细胞存活率、SOD和GSH-Px活性、Bcl-2蛋白表达升高,心肌细胞凋亡率、MDA、TNF-α、IL-1β、IL-6、Cleaved Caspase-3和Bax蛋白表达降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:miR-93-5p通过降低H/R心肌细胞的炎症和氧化应激水平,发挥抗细胞凋亡作用。