葡萄籽多酚对心肌梗死大鼠心肌细胞凋亡及TLR4/NF-κB蛋白的影响

目的:探讨葡萄籽多酚(GSP)对心肌梗死大鼠心肌细胞凋亡及Toll样受体4(TLR4)/核转录因子-κB(NF-κB)蛋白的影响。方法:将60只无特定病原体(SPF)级SD雄性大鼠随机分为假手术组、急性心肌梗死(AMI)组、低GSP组、中GSP组、高GSP组和药物对照组,每组10只,除假手术组外其他组均建立心肌梗死大鼠模型,造模成功后,低GSP组、中GSP组、高GSP组分别给予100、200、300 mg/kg的GSP溶液灌胃,药物对照组给予20 mg/kg的阿托伐他汀灌胃,采用图像分析系统计算心肌梗死体积,计算心肌组织含水量,采用苏木精-伊红(HE)染色观察心肌组织病理形态,脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)法检测各组大鼠心肌细胞凋亡率,免疫印迹及逆转录实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测TLR4/NF-κB表达水平。结果:与假手术组比较,AMI组心肌梗死体积增加(P<0.05),与AMI组比较,低GSP组、中GSP组、高GSP组和药物对照组心肌梗死体积缩小(P<0.05),与假手术组比较,AMI组心肌组织含水量升高(P<0.05),与AMI组比较,高GSP组和药物对照组心肌组织含水量降低(P<0.05)。假手术组大鼠心肌细胞排列整齐,结构完整,无炎症浸润;AMI组大鼠心肌细胞紊乱及数目减少,排列紊乱出现大量肌肉丝溶解及炎症浸润,与AMI组比较,低GSP组、中GSP组、高GSP组和药物对照组心肌细胞紊乱有效改善,炎症浸润逐渐降低。AMI组心肌细胞凋亡率高于假手术组(P<0.05),与AMI组比较,低GSP组、中GSP组、高GSP组和药物对照组心肌细胞凋亡率均降低(P<0.05),且高GSP组和药物对照组大鼠心肌细胞凋亡率低于低GSP组、中GSP组(P<0.05)。AMI组TLR4及NF-κB蛋白及mRNA表达高于假手术组(P<0.05),与AMI组比较,低GSP组、中GSP组、高GSP组和药物对照组TLR4及NF-κB蛋白及mRNA均降低(P<0.05),且与低GSP组、中GSP组比较,高GSP组和药物对照组大鼠心肌组织中TLR4及NF-κB蛋白及mRNA表达明显降低(P<0.05)。结论:GSP能够显著缩小心肌梗死大鼠心肌梗死体积,降低心肌组织含水量,抑制心肌细胞凋亡,其作用机制可能与抑制TLR4/NF-κB表达相关。