大黄素甲醚对糖尿病视网膜病变模型大鼠的保护作用及机制

目的 探讨大黄素甲醚(physcion,PHY)对糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)大鼠的治疗作用及其可能机制。方法 将SPF级雄性SD大鼠分为5组(n=12):空白组、模型组、PHY低剂量组、PHY中剂量组和PHY高剂量组,治疗4 w后,检测各组大鼠的空腹血糖(fasting plasma glucose,FPG)、糖化血红蛋白(glycosylated hemoglobin,HbA1c)、空腹胰岛素(fasting insulin,FINS)、白介素(interleukin,IL)-1β、IL-6和肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)和视网膜超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(Catalase,CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase,GSH-PX)和丙二醛(Malondialdehyde,MDA)的水平;对大鼠视网膜进行苏木精和伊红(Hematoxylin and eosin,HE)染色和原位末端转移酶标记技术(TdT-mediated dUTP nick-end labeling,TUNEL)染色;分析视网膜BCL2相关X蛋白(BCL2 Associated X Protein,BAX)、B淋巴细胞瘤-2(BCL2)和血管内皮生长因子A(Vascular endothelial growth factor A,VEGFA)mRNA水平,视网膜细胞核核因子红系2相关因子2(Nuclear factor erythroid 2 related factor 2,NRF2)、Kelch样ECH关联蛋白1(Kelch like ECH associated protein 1,Keap1)和磷酸化核因子-kappa B p65(p-NF-κB p65)蛋白表达水平。结果 与空白组比较,模型组大鼠的FPG、HbA1c和FINS水平升高(P<0.05),视网膜中IL-1β、IL-6和TNF-α水平升高(P<0.05),视网膜中SOD、CAT和GSH-PX水平降低(P<0.05),视网膜中MDA水平升高(P<0.05);视网膜出现明显病变,视网膜TUNEL阳性率以及BAX和VEGFA的mRNA水平升高(P<0.05),视网膜中BCL2的mRNA水平降低(P<0.05);视网膜细胞核NRF2蛋白水平降低(P<0.05),Keap1和p-NF-κB p65蛋水平升高(P<0.05)。与模型组比较,PHY低剂量组、PHY中剂量组和PHY高剂量组大鼠的FPG、HbA1c和FINS水平降低(P<0.05),视网膜中IL-1β、IL-6和TNF-α水平降低(P<0.05),视网膜中SOD、CAT和GSH-PX水平升高(P<0.05),视网膜MDA水平降低(P<0.05);视网膜病变减轻,视网膜中TUNEL阳性率以及BAX和VEGFA的mRNA水平降低(P<0.05),视网膜中BCL2对的mRNA水平升高(P<0.05);视网膜细胞核NRF2蛋白水平升高(P<0.05),Keap1和p-NF-κB p65蛋白水平降低(P<0.05)。结论 大黄素甲醚可有效减轻DR大鼠视网膜损伤,其机制可能与抑制VEGF表达、NRF2介导的氧化应激和NF-κB介导的炎症反应有关。