miR-21靶向调节TIMP3/MMP9信号通路对宫颈癌细胞增殖、凋亡和迁移的影响

目的探讨miR-21靶向调节基质金属蛋白酶(MMP)组织抑制因子(TIMP3)/MMP9信号通路对宫颈癌细胞增殖、凋亡和迁移的影响。方法以26例宫颈癌组织、体外培养的人正常宫颈上皮细胞HUCEC及人宫颈癌细胞SiHa、C33A和Hela为研究对象,qRT-聚合酶链反应(PCR)检测miR-21和TIMP3 mRNA表达水平。利用Lipofectamine2000对Hela细胞进行转染,并分为空白对照组(常规培养Hela)、anti-miR-NC组(转染anti-miR-NC)、anti-miR-21组(转染anti-miR-21)、anti-miR-21+si-NC组(共转染anti-miR-21和si-NC)和anti-miR-21+si-TIMP3组(共转染anti-miR-21和si-TIMP3)。双荧光素酶实验检测miR-21和TIMP3的靶向关系;CCK-8法、划痕法、流式细胞术分别检测各组Hela细胞增殖、迁移和凋亡情况;Western印迹检测Hela细胞TIMP3、MMP9蛋白表达。结果与癌旁组织和人正常宫颈上皮细胞HUCEC相比,宫颈癌组织和细胞SiHa、C33A、Hela中miR-21表达水平显著升高,TIMP3 mRNA表达水平显著降低(P<0.05),使用miR-21表达水平最高的Hela细胞进行后续研究。双荧光素酶实验结果表明,TIMP3是miR-21的靶基因,且被miR-21负向调控(P<0.05)。与空白对照组相比,转染anti-miR-21后,Hela细胞的吸光度(OD)值(24、48、72 h)、划痕愈合率、MMP9表达水平显著降低,凋亡率和TIMP3表达水平显著升高(P<0.05);在转染anti-miR-21的基础上共转染si-TIMP3,Hela细胞的上述指标均得到明显逆转(P<0.05)。结论抑制miR-21表达可抑制宫颈癌细胞增殖、迁移并促进凋亡,这可能与靶向调节TIMP3/MMP9信号通路有关。