3种方法对曲霉菌鉴定结果对比研究

目的 对传统手工法、分子测序、基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)3种鉴定方法进行比较,建立一套适合该实验室的快速准确的丝状真菌鉴定标准操作流程。方法 收集2020年1月至2021年3月于重庆医科大学附属第二医院住院患者的56株曲霉菌株,分别采用上述3种鉴定方法对菌株进行鉴定,比较鉴定准确率;比较传统甲酸乙腈萃取法与改良锆珠甲酸乙腈法两种前处理方法对质谱鉴定能力的影响;比较曲霉菌不同培养基及培养天数对质谱鉴定能力的影响。结果 以分子测序为金标准,传统手工法鉴定准确率为57.1%(32/56),MALDI-TOF MS鉴定准确率为92.9%(52/56);菌丝在锆珠中震荡研磨后,再进行甲酸乙腈萃取获得的质谱鉴定能力更佳;曲霉菌用马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)培养3 d和5 d时,质谱鉴定准确率最高,分别为73.2%和75.0%。结论 MALDI-TOF MS操作简便、快速,且准确性高。曲霉菌用PDA液体水平振摇培养后,使用锆珠甲酸乙腈法前处理,进行质谱鉴定可获得较理想的鉴定效果和蛋白图谱质量,适合常规实验室曲霉菌的质谱鉴定。