摘要
目的探讨GTP结合蛋白(GTPBP)2对CD133阳性结直肠癌干细胞增殖、细胞周期、迁移、侵袭和凋亡的影响及其分子机制。方法选取30例结直肠癌患者的结直肠癌组织及相应癌旁组织;利用免疫磁珠法分选出人结直肠癌SW480细胞的CD133阳性肿瘤干细胞,将其分为Con组、si-NC组、si-GTPBP2组;实时荧光定量-聚合酶链反应(RT-qPCR)检测GTPBP2 mRNA表达水平;Western印迹检测GTPBP2表达、干细胞表面标志物表达及增殖、细胞周期、迁移、侵袭、凋亡和Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白表达;四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测细胞增殖;Transwell实验检测细胞迁移和侵袭;流式细胞术检测细胞凋亡和周期。结果与癌旁组织相比,结直肠癌组织中GTPBP2表达水平明显升高(P<0.05);沉默GTPBP2可明显抑制结直肠癌干细胞增殖、迁移和侵袭,明显阻滞细胞周期进程,并明显促进凋亡,结直肠癌干细胞存活率、S期细胞比例、迁移、侵袭细胞数及细胞周期蛋白(Cyclin)D1、细胞核增殖抗原(Ki)-67、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、B细胞淋巴瘤(Bcl)-2表达水平明显降低,G0-G1细胞比例、细胞凋亡率及p21、Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达水平明显升高(P<0.05);沉默GTPBP2可明显降低Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白磷酸化-糖原合成酶激酶(p-GSK)3β和β-catenin表达水平(P<0.05)。结论沉默GTPBP2可能通过抑制Wnt/β-catenin信号通路导致结直肠癌干细胞增殖、迁移、侵袭能力下降,细胞周期阻滞和凋亡增强。
出处
《中国老年学杂志》
CAS
北大核心
2023年第24期6087-6091,共5页
Chinese Journal of Gerontology
基金
武汉市医学科研项目(No.WX20A07)。