双生病毒AC4基因的克隆及原核表达

Cloning and Prokaryotic Expression of AC4 Gene of Gemini Virus

通过设计特异性引物,利用PCR技术克隆双生病毒AC4基因,并与原核表达载体pGEX-4T-1连接,导入大肠杆菌BL21(DE3)中,利用IPTG成功诱导表达出分子量约36 KD的GST-AC4融合蛋白。对IPTG诱导浓度、诱导时间、诱导温度进行优化,获得最佳表达条件:IPTG诱导浓度0.50 mmol/L,诱导时间3 h,诱导温度32℃。研究结果对于下一步大量制备并分离纯化AC4蛋白、制备抗血清及研究SXYC-X4 AC4基因的功能具有指导意义。