消脂化纤汤联合BM-MSCs移植对NASH肝硬化小鼠肝细胞再生的影响研究

目的 探讨消脂化纤汤联合骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)移植,对改善实验性非酒精性脂肪性肝炎(NASH)相关肝硬化炎症损伤及肝细胞再生的效应及机制。方法 62只SPF级健康雄性C57BL/6小鼠随机分为6组:空白对照组、模型对照组、自然恢复对照组、消脂化纤汤组、BM-MSCs移植组、消脂化纤汤联合BM-MSCs移植组,每组8只。除空白对照组和BM-MSCS组外,其余5个组小鼠均采用蛋氨酸-胆碱缺乏饮食联合四氯化碳腹腔注射制备NASH肝硬化模型,共12周,12周末随机处死6只小鼠验证模型成功。分离健康小鼠BM-MSC并进行体外培养,取第三代培养细胞通过小鼠尾静脉注射进行移植。依据实验设计,各组小鼠于第13周开始给予相应干预措施,共4周。第16周末处死各组小鼠,提取血液并分离血清;在无菌低温条件下取小鼠肝脏并制备肝脏组织匀浆上清液,并分离肝脏原代细胞,提取肝脏细胞总mRNA。检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、白蛋白(ALB)含量;检测肝组织肝再生增强因子(ALR)水平;检测肝细胞白介素17受体(IL-17R)信号通路关键分子IL-17RA、肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)、NF-κB激活剂1(ACT1)、核因子κB(NF-κB)mRNA表达水平。结果 与空白对照组相比,模型对照组及自然恢复对照组小鼠肝脏表面肉眼结节形成,脾脏增大;血清ALT及AST水平升高,ALB及ALR含量降低;IL-17R介导的信号通路关键分子mRNA表达升高,均有统计学意义(P<0.01)。模型对照组与自然恢复对照组之间指标无统计学意义(P>0.01)。与模型对照组及自然恢复对照组相比,各干预组相关检测指标均明显改善(P<0.01)。消脂化纤汤组与BM-MSCs移植组相比,指标统计无统计学意义(P>0.01)。消脂化纤汤联合BM-MSCs移植组与消脂化纤汤组及BM-MSCs移植组相比,相关检测指标均明显改善,有统计学意义(P<0.01)。结论 消脂化纤汤联合BM-MSCs移植可有效改善NASH肝硬化小鼠肝脏功能,促进肝脏细胞再生;其机制与下调肝脏细胞IL-17R介导的细胞信号通路有关。消脂化纤汤联合BM-MSCs移植方案对NASH肝硬化的作用效应优于消脂化纤汤及BM-MSCs移植单一干预方案。