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壮骨方对高糖培养下骨祖细胞成骨分化及VEGF表达的影响

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摘要 目的 通过体外细胞实验,探讨壮骨方对高糖培养下的骨祖细胞血管内皮生长因子(VEGF)表达、骨祖细胞增殖及成骨分化的影响。方法 采用全骨髓细胞贴壁法分离纯化SD大鼠股骨进行骨祖细胞原代培养,待细胞生长至合适浓度后将细胞随机分为阴性对照组、高糖组、高糖+20%壮骨方组、高糖+40%壮骨方组、20%壮骨方组、40%壮骨方组。干预后采用MTT法检测骨祖细胞增殖水平,使用流式细胞术检测骨祖细胞凋亡水平,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)、蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组骨祖细胞血管内皮生长因子的表达水平;将细胞进行成骨诱导及药物干预后,采用碱性磷酸酶(ALP)染色、茜素红染色检测细胞成骨分化情况,采用免疫荧光法检测细胞Osterix表达水平。结果 与阴性对照组比较,高糖培养下骨祖细胞增殖受到显著抑制(P<0.01)、凋亡率显著增加(P<0.01)、VEGF蛋白及mRNA水平显著降低(P<0.01);与高糖组比较,高糖+20%壮骨方组、高糖+40%壮骨方组骨祖细胞增殖抑制情况明显改善(P<0.05)、凋亡率明显减少(P<0.01)、VEGF蛋白及mRNA水平明显上调(P<0.01)。与诱导组比较,高糖干预后骨祖细胞ALP和茜素红着色减少,Osterix表达水平显著降低(P<0.01);与高糖+诱导组比较,高糖+诱导+20%壮骨方组骨祖细胞ALP和茜素红着色增多,Osterix表达水平显著提高(P<0.01)。结论 壮骨方能促进骨祖细胞增殖、抑制细胞凋亡,并可能通过提高骨祖细胞VEGF水平促进骨祖细胞成骨分化,干预糖尿病性骨质疏松症进程。
出处 《时珍国医国药》 CSCD 北大核心 2023年第10期2368-2372,共5页 Lishizhen Medicine and Materia Medica Research
基金 国家自然科学基金地区基金(81860784) 广西自然科学基金(2020GXNSFAA297193) 广西中医药大学赛恩斯新医药学院校级科研项目(2022MS003) 中国民族医药学会科研项目(2021Z1141-580302) 广西中医基础研究重点实验室资助项目(K201137905) 广西中医药大学2022研究生教育创新计划项目(YCSY2022022)。
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