不同剂量人生长激素对卵巢去势大鼠牙周膜干细胞成骨分化的影响

目的 分析不同剂量人生长激素对卵巢去势大鼠牙周膜干细胞成骨分化能力的影响。方法 选取20只雌性SD大鼠,分为正常组、卵巢去势组各10只,正常组不做任何处理,卵巢去势组摘除双侧卵巢,分析两组体质量、血清钙(Ca^(2+))、雌二醇(E2)水平、股骨骨密度(BMD)及股骨组织变化。分离卵巢去势组牙周膜干细胞,分为空白组、人生长激素组,空白组细胞常规培养,人生长激素组分为10、50、100、150、200μg/L 5个干预剂量亚组,分别在细胞培养液中加入10、50、100、150、200μg/L人生长激素培养。测定细胞增殖能力、成骨分化能力、碱性磷酸酶(ALP)活性、成骨基因表达量及细胞外调节蛋白激酶(ERK)1/2、Runt相关转录因子(Runx)2信号通路蛋白表达量。结果 人生长激素组24、48、72 h细胞增殖率高于空白组,且随着人生长激素组浓度增加,24、48、72 h细胞增殖率逐渐升高,有统计学差异(P<0.05)。空白组仅有少量矿化结节,人生长激素组矿化结节增多,且随着浓度增加矿化结节逐渐增多。人生长激素组骨钙素(OCN)、骨桥蛋白(OPN)基因表达量、ALP活性高于空白组,且随着人生长激素组浓度增加,OCN、OPN基因表达量、ALP活性逐渐升高,有统计学差异(P<0.05)。人生长激素组ERK1/2、p-ERK1/2、Runx2蛋白表达量高于空白组,且随着人生长激素组浓度增加ERK1/2、p-ERK1/2、Runx2蛋白表达量逐渐升高,有统计学差异(P<0.05)。结论 人生长激素可促进卵巢去势大鼠牙周膜干细胞增殖、成骨分化,其可能经ERK1/2-Runx2信号通路,调控成骨相关基因发挥作用,且呈剂量依赖,高剂量作用最为显著。