摘要
目的探讨仙鹤草-黄连药对对葡聚糖硫酸钠(Dextran sulfate sodium,DSS)诱导的急性炎症性肠病小鼠结肠黏膜损伤的防治作用及其机制。方法将70只C57BL/6N小鼠随机分为空白组、模型组、仙鹤草-黄连10∶1给药组、仙鹤草-黄连5∶1给药组、仙鹤草-黄连2∶1给药组,空白组6只,其余各组16只。以2.5%DSS溶液建立急性炎症性肠病模型。观察并记录小鼠每日进食和饮水情况、统计疾病活动指数(disease activity index,DAI)评分、测量结肠长度;采用苏木素-伊红(hematoxylin-eosin stain,HE)染色法观察小鼠结肠组织病理学变化;MPO检测试剂盒检测小鼠血清MPO活力;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测外周血中IL-1β、IL-17A及结肠组织中TNF-α、IL-17A、IL-1β水平;免疫组化(IHC)检测结肠组织紧密连接蛋白ZO-1和Occludin蛋白表达情况;蛋白免疫印迹法(Western blot)考察对TLR4/MyD88/NF-κB炎症信号通路相关蛋白的影响;通过阿利新蓝染色、免疫组化染色、TUNEL染色分析结肠杯状细胞形态及功能。结果与空白组比较,模型组小鼠体重显著下降(P<0.0001),腹泻及便血严重,疾病活动指数(DAI)评分显著增加(P<0.0001);血清IL-1β、IL-17A表达量显著升高(P<0.01),血清MPO活力值升高(P<0.05);结肠组织IL-1β、IL-17A、TNF-α表达量显著升高(P<0.01);模型组小鼠结肠组织TLR4、MyD88、NF-κB p65蛋白表达水平增加(P<0.05)。与模型组比较,各给药组小鼠体重增加(P<0.05),DAI评分有显著改善(P<0.001),结直肠长度明显增长(P<0.05);HE染色发现各给药组结肠黏膜损伤明显改善,炎症细胞浸润减少;血清IL-1β、IL-17A表达量降低(P<0.05);结肠组织IL-1β、IL-17A、TNF-α表达量降低(P<0.05);各给药组杯状细胞、黏蛋白、紧密连接蛋白ZO-1和Occludin含量增多;与模型组比较,各给药组小鼠结肠组织中炎症相关蛋白TLR4、MyD88、NF-κB p65表达水平显著下降(P<0.05);小鼠肠上皮细胞凋亡减少(P<0.05)。结论仙鹤草-黄连药对可通过修复肠黏膜物理屏障,并抑制TLR4/MyD88/NF-κB信号通路的活化,同时下调炎症因子水平,从而维护肠粘膜稳态,起到防治急性炎症性肠病的作用。
出处
《时珍国医国药》
CAS
CSCD
北大核心
2023年第11期2641-2647,共7页
Lishizhen Medicine and Materia Medica Research
基金
江苏省自然科学基金(BK20201400)
国家中医药管理局全国名中医刘沈林工作室(国中医药办人教函[2018]119号)
江苏高校优势学科建设工程资助项目(苏政办发[2018]87号)
江苏省研究生科研与实践创新计划(KYCX23-2118)。